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圖一 NHS-Fluorescein與蛋白接枝原理
套組原理
本套組以琥珀醯亞胺酯基(NHS ester)活化螢光素(Fluorescein),用以標記抗體或蛋白,作為免疫染色或是細胞蛋白質示蹤之應用。活化過的螢光素,可直接與目標抗體蛋白或其他含一級胺(伯胺)基的大分子形成共價鍵。本套組包含離心透析管,以去除未反應的螢光素,和樣品中其他可能干擾的小分子,例如Tris緩衝液,和其他胺類化合物,這些物質會干擾檢測或標記反應。標記過程非常簡單:將NHS Fluorescein(試劑A)加入位於濾膜上方的蛋白質溶液中,並在37℃下孵育10-30分鐘。過量的未反應之螢光素分子可透過離心透析管去除。以螢光素標記後的蛋白,其激發波長和發射波長分別為500 nm和525 nm。此試劑盒包含標記所需的必要所有試劑,包括用於保存標記後的蛋白保存液。
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參考文獻
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